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蛋白酶K
CAS No.: 39450-01-6
分子式: n.a.
分子量: 74.92
備注: 中文名稱蛋白酶K中文同義詞蛋白酶K;蛋白酶K(原裝);蛋白內(nèi)切酶K;內(nèi)肽酶K;肽酶K;蛋白酶K(凍干粉);蛋白酶K/PROTEINASEK;蛋白酶K(特價產(chǎn)品)英文名稱ProteinaseK英文同義詞ProteinaseK,PowderAndSolutionAvailable;ProteinaseK,fromTritirachiumalbumLimber;ProteinaseKfromTritirachiumalbumca.8DMC-U/mg;PROTEINASEK,LYOPHILIZEDPOWDER,BIOTECHGRADE;ProteinaseKfortritirachiumalbumserine.;ProteaseK;TritirachiumalbumproteinaseK;ProteinaseKfromTritirachiumalbum[EC3.4.21.64]fromTritirachiumalbumCAS號39450-01-6分子式C29H27N2O12P分子量626.504641EINECS號254-457-8相關(guān)類別溶劑;微生物;標(biāo)準(zhǔn)品和標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì);雜環(huán);生化試劑-酶類;試劑;高純生化試劑;分子生物試劑-核酸相關(guān);化學(xué)試劑;酶和輔酶;酶;醫(yī)藥與生物化工;輔酶/酶;高端生物試劑;蛋白酶;生化試劑;氨基酸;輔酶;分子生物學(xué);原料;各種化學(xué)試劑;氨基酸類;酶與輔酶;DNA修飾酶;重組蛋白酶;生物試劑;生物化工;檢驗試劑;生化試劑-酶和輔酶;化學(xué)助劑;生物緩沖劑;化學(xué)試劑;化工原料;其他化工產(chǎn)品;醫(yī)藥原料;化學(xué)原料;酶制劑;通用生化試劑-酶與輔酶;生物科學(xué)-生化試劑;enzyme;Furans,Coumarins;有機中間體;蛋白酶k;其它;分子診斷-蛋白酶K干粉;分子診斷-蛋白酶K溶液;醫(yī)用原料;對照品Mol文件39450-01-6.mol結(jié)構(gòu)式蛋白酶K性質(zhì)儲存條件2-8°C溶解度H2O:10mg/mL,微渾濁,棕黃色形態(tài)粉末顏色白色PH值pH7.5~12水溶解性Misciblewithwater.InChIKeyCDWGKFQEIBBJOF-BIZWTRPUNA-NSMILESN12[C@](OP(O)(OC3=CC=C([N+]([O-])=O)C=C3)=O)([C@H]([C@H](O)C)C1=O)[C@](C)(OC1=CC=CC=C1)C(OC1=CC=CC=C1)=C2C(OC)=O|&1:1,16,17,22,r|CAS數(shù)據(jù)庫39450-01-6蛋白酶K用途與合成方法簡介蛋白酶K是一種從白色念珠菌分離出來的強力蛋白溶解酶,具有很高的比活性,是DNA提取的關(guān)鍵試劑。該酶在較廣的pH范圍(4?12.5)內(nèi)及高溫(50?70°C)均有活性,用于質(zhì)?;蚧蚪MDNA、RNA的分Chemicalbook離。性質(zhì)蛋白酶K能消化天然的角蛋白(Kerati),而得名蛋白酶K。其主要的切割位點是脂肪族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽鍵。由于其廣泛地的切割能力,在實驗室中很常用。此蛋白酶屬于絲氨酸蛋白酶SB超家族中的S8家族(枯草桿菌蛋白酶也屬于這個超家族)。蛋白酶K的分子量為28.9千道爾頓。酶活性蛋白酶K的酶活力,>30U/mg。在37℃,以血紅蛋白為底物,1分鐘內(nèi)可以產(chǎn)生相當(dāng)于1微摩爾酪氨酸Folin陽性的氨基酸或多肽的蛋白酶K的量,定義為一個單位蛋白酶K酶活力。在很寬的pH范圍內(nèi)有效,有效的pH范圍為pH4.0-12.5,最佳pH范圍為pH7.5-8.0。蛋白酶K的最佳反應(yīng)溫度為65℃,但在65℃或更高的溫度蛋白酶K自身的也非常迅速地降解。很多時候反應(yīng)溫度選擇50-55℃。應(yīng)用蛋白酶K時常應(yīng)用于分子生物學(xué)領(lǐng)域。在制備核酸時,蛋白酶K可以將雜蛋白去除,并迅速使核酸酶失活,避免其降解目標(biāo)產(chǎn)物DNA和RNA。另外,蛋白酶K還有其他優(yōu)點,它在變性劑存在下仍能保有活性,如SDS、尿素、EDTA等等,這點與其他蛋白酶(如胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶)相當(dāng)不同。用途蛋白酶K由于能夠消化角蛋白(kratin)因此被命名為蛋白酶K。蛋白酶K家族包含了各種由真菌、酵母及革蘭氏陰性細菌分泌的細胞內(nèi)肽酶,其中細菌分泌的酶有高度的序列相似性(>55%)。林伯氏白色念球菌(TritirachiumalbumLimber)分泌產(chǎn)生蛋白酶K是該家族的模式蛋白。蛋白酶K對大多數(shù)底物均有切割活性,但是偏好于帶有脂肪族及芳香烴的肽鏈。其屬于絲氨酸蛋白酶,擁有典型的絲氨酸活性位點:Asp39–His69–Ser224。其含有一個單練肽鏈包含277氨基酸位點,并擁有2個二硫鍵和一個空置的半胱氨酸位點以及兩個鈣離子結(jié)合位點。蛋白酶K的應(yīng)用主要為核酸提取時去除DNA酶和RNA酶,并且可將結(jié)合于基因組上的組蛋白去除,還可用于堿性磷酸酶的失活。目前分子生物學(xué)技術(shù)已應(yīng)用于許多檢測標(biāo)準(zhǔn)中,例如轉(zhuǎn)基因檢測、動物屬性檢測、致病微生物檢測等。在分子生物學(xué)檢測中核酸的提取質(zhì)量直接影響了后續(xù)PCR反應(yīng)的擴增效率。許多標(biāo)準(zhǔn)在核酸提取步驟中都設(shè)立了添加蛋白酶K消化的步驟,以期提取較純的核酸。為了保護核酸,分子生物學(xué)核酸提取實驗中通常含有EDTA等試劑,由于EDTA可以與金屬離子絡(luò)合,因此可能會導(dǎo)致酶活性受到影響;并且通常為pH8.0時和55℃條件下進行消化,不同pH值和溫度條件會使得酶活性受到影響。用途分離DNA和RNA期間使核苷酸酶蛋白失活。去除內(nèi)毒素對陽離子蛋白的約束,如溶菌酶和核糖核酸酶。研究報告顯示用于分離肝,酵母,綠豆線粒體測定細胞膜上的酶用于抗體標(biāo)記,石蠟包埋組織切片中暴露抗原結(jié)合位點。消化腦組織樣本中的蛋白質(zhì),用于朊病毒的傳染性海綿狀腦?。═SE)的研究


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